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在培植蛋白的时候为什么要用多聚?多聚发挥沃vs91化学工业仪器网

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放大字体  缩小字体    发布日期:2021-01-26  来源:仪器网  作者:Mr liao  浏览次数:67
核心提示:在培养细胞的时候为什么要用胰蛋白酶?胰蛋白酶起到什1.吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。2.加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁

在培养细胞的时候为什么要用胰蛋白酶?胰蛋白酶起到什

1.吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
2.加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
3.显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
4.如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
5.如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
胰蛋白酶为蛋白酶的一种,是从牛、羊、猪的胰脏中所提取的一种丝氨酸达标水解酶。它不仅起到消化酶的作用,还能限制分解糜蛋白酶原、磷脂酶等其它酶的前体,起活化作用。在细胞培养中,胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的反应是不一样的,分散细胞的活性还要与其的浓度、温度和时间有关。在pH值8.0、温度为37℃的条件下是胰酶分散细胞的作用能力zui强。
 

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