毛细管电泳仪分析对进样技术要求很高,进样操作事项如下: 1.进样区带越小越好:无论采用何种进样方式,毛细管插入样品溶液的深度一般要少于毛细管总长度的1%~2%,以尽量减少样品溶液经毛细吸附进入毛细管而影响进样量的性。样品管中溶液少为5 L,进样体积为1~50nL。 2.进样时间以短为宜:通常进样时间为0.5~1s,此时毛细管粘附的样品量相对于吸入的体积可忽略不计。虽然毛细管电泳的进样时间可至 0.1s,但由于毛细管插入样品管时不可避免地会粘附一些溶液,进样时间过短会影响分析的重复性。 3.样品预浓缩:受毛细管内总体积的制约,对于浓度很稀的样品,毛细管电泳不能象HPLC那样可加大进样量来提高检测灵敏度,但可采取一些措施来改善。 毛细管电泳仪峰面积重现性的因素及解决办法: 1.温度变化。 原因与结果:改变粘度和进样量。 解决办法:毛细管恒温。 2.样品蒸发。 原因与结果:增加样品浓度。 解决办法:加盖和冷却自动进样器。 3.样品过载。 原因与结果:额外进样。 解决办法:使用进样端平滑的毛细管。 4.毛细管插入样品引起零进样。 原因与结果:额外进样。 解决办法:不能消除,但能量化。 5.毛细管电泳仪分壁吸附样品。 原因与结果:峰形畸变无样品流出。 解决办法:改变缓冲液pH值,增加浓度,使用添加剂。 6.信噪比低。 原因与结果:积分误差。 解决办法:优化积分参数,增加样品浓度,用峰高测定。 7.电动进样。 原因与结果:样品基质不同。 解决办法:采用压力进样。