测量细胞电阻和电压 一. 物品准备(在超净台中准备如下物品) 1. 完全充好电的Millicell ERS-2系统 2. STX04测试电极 3. STX01或者STX03电极 (用于检测Millicell 6, 12和24孔板), STX00电极(用 于检测Millicell 96孔板),如果要测量电压则要先进行电极平衡 4. 未培养细胞的Millicell培养皿(对照) 5. 培养了细胞的Millicell培养皿 6. 70%的乙醇 7. 3/32 平头螺丝刀 二. 电极灭菌 电极是非无菌的,我们建议使用乙醇灭菌,也可以用环氧乙烷、紫外线或者 杀菌剂灭菌。不能使用高温或者火焰灭菌,因为电极无法承受高温。乙醇灭 菌流程如下: 1. 将电极插入70%乙醇浸泡15min进行灭菌,取出电极风干15秒;注意: 不能将电极浸入乙醇中超过30min,这会损坏电极的保护层,缩短其使 用寿命。 2. 用与培养基相似的电极液(或者0.1-0.15M NaCl/KCl)冲洗电极; 3. 若是进行电阻测量,此时电极已可以使用; 4. 若是进行电压测量,将电极在与培养基相似的无菌电极缓冲液中平衡15 分钟。注意:为了保持无菌,可以将电极放在紫外灯下短时间照射。 三. 电阻测量(量程:0-9999 ,灵敏度:1 ) 注意:虽然仪表量程能够达到13,000 ,但是10,000 及以下的读数才具准确 性。 1. 将细胞置于室温下平衡30分钟; 2. 如前所述,测试Millicell ERS-2系统; 3. 确保仪表与充电器断开; 4. 将模式打到Ohms,开关打到ON; 5. 将电极短端浸入培养板内部,长端浸入外部。 短端不要碰到小室膜上生长的细胞,长端需碰到外 侧孔的底部。为了实验结果的稳定和可重复性, 确保电极平稳,并与培养板成90 ; 6. 记录电阻值。