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电泳技术是分子生物学研究不可缺的手段

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放大字体  缩小字体    发布日期:2022-10-31  浏览次数:8
核心提示:  事实证明,在科学飞速发展的今天,无论我们从事什么领域的研究,除了有良好的理论基础外,更重要的是依靠先进的技术、优秀的

  事实证明,在科学飞速发展的今天,无论我们从事什么领域的研究,除了有良好的理论基础外,更重要的是依靠先进的技术、优秀的仪器设备和良好的研究环境。除了一般生物实验室的传统仪器外,标准分子生物实验室还有一些特殊用途的仪器。这些仪器通常精确且昂贵。以下是这些仪器的使用方法和注意事项。


  一、冷冻离心机


  低温分离技术是分子生物学研究的重要手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其他生物样品的分离和制备实验与低温离心技术是不可分割的,因此低温冷冻离心机已成为分子生物学研究的重要仪器。在中国,有许多制造商生产冷冻离心机,实验室的高速冷冻离心机是GL-20G-Ⅱ类型(上海安亭),落地式。配角转头:6.×50ml,12×10ml和12×1.5ml。极限转速20000rpm。


  1.安装和调试


  离心机应放置在水平坚实的地面上,距离至少10分钟cm在通风良好的环境中,周围空气应为中性,无导电粉尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应为0~30℃两者之间,相对湿度小于80%。试运行前,打开盖门,用手移动旋转轴,轻巧灵活。只有在没有异常现象的情况下才能使用旋转头。转子准确到位后,打开电源开关,然后用手按下门开关,然后按下操作键,旋转后立即停止,观察旋转轴的转向。如果逆时针旋转正确,机器可以投入使用。



  2.操作程序


  (1)插入电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速定时系统数字管显示的闪烁数字为机器工作速度的出厂设置,温控系统数字管显示此时离心腔的温度。


  (2)设置机器的工作参数,如工作温度、工作时间、工作速度等。


  (3)将预先平衡的样品放在转头样品架上,关闭机盖。


  (4)按下控制面板的操作按钮,离心机开始运行。其运行速度在预设的加速时间内提高到预设值。


  (5)离心机在预设的运行时间内(不含减速时间)开始减速,其速度在预设的减速时间内降至零。


  (6)按控制面板上的停止键,数码管显示dedT,闪烁的速度值在几秒钟后显示出来,这时机器已经准备好下一次工作了。


  3.注意事项


  (1)离心机应始终处于水平位置,外部电源系统的电压要匹配,并且要求有良好的接地线,机器不使用,要拔掉电源插头。


  (2)开机前应检查转头安装是否牢固,机腔内是否有异物。


  (3)离心筒离心时,应提前平衡样品。


  (4)挥发性或腐蚀性液体离心时,应使用带盖的离心管,并确保液体不泄漏,以免腐蚀机腔或造成事故。


  (5)不要随意改变机器的工作参数,除了工作温度、运行速度和运行时间,以免影响机器的性能。速度设置不得超过最大速度,以确保机器的安全运行。


  (6)如果使用中出现0.00或其他数字,如果机器不运行,应关闭机器并切断电源。10秒后,重新启动机器。设定的速度显示后,按下操作按钮,机器将照常工作。


  (7)在机器运行过程中或转子未停稳时,不得打开盖门,以免发生事故。


  (8)每次操作完成后,应做好使用记录,并定期检修机器的性能。


  二、电泳仪


  电泳技术是分子生物学研究不可或缺的手段。电泳一般分为自由界面电泳和区域电泳。自由界面电泳不需要支持,如等速电泳、密度梯度电泳和微电泳。目前,这种电泳很少使用。区域电泳需要各种类型的物质作为支撑。常用的支撑是滤纸、醋酸纤维膜、非凝胶支撑、凝胶支撑和硅胶―G在分子生物学实验中,最常用的薄层等是琼脂糖凝胶电泳。电泳可以用来定性或定量地分析不同的物质,或分析某些混合物或提取和制备单个组件。DYY-以12型电脑三恒多用电泳仪(北京六一仪器厂)为例介绍其使用方法。


  1.使用方法


  (1)根据电源开关,显示屏出现“欢迎使用DYY-12型计算机三恒多用电泳仪表…”等字后,同时系统初始化,蜂鸣4声,设置常设置。屏幕转换成参数设置状态,见图1:


  U:0V U=100V|Mode:STD


  I:0mA I=50mA|


  P:0W P=50W|


  T:00:00 T=01:00|


  其中:左边大写U:I:P:T:电泳实际值;程序的常设值(预设值)在中间部分显示。Mode(模式):STD(标准);TIME(定时);VH(伏时);STEP(分步)


  (2)设置工作程序。用键盘输入新的工作程序。例如,需要工作电压U=1000V,电流I限制为200mA功率W限制在1000W时间T在3小时20分钟内,输出在到达时自动关闭。操作步骤如下:


  ①按“模式”键,标准工作模式(STD)转为定时(TIME)


  模式。每按模式键,其工作方式按以下顺序改变:STD®TIME®VH®STEP®STD。


  ②先设置电压U,按“选择”按键,先将其反向显示,然后输入数字键设置该参数的值。按1000的数字,然后设置电压。


  ③设置电流I,按“选择”先使I反显示,然后输入数字200。


  ④设置功率P,按“选择”先使P反显,然后输入数字100。


  ⑤设置时间T,按“选择”键,先使T反显,再输入数字320。如果输入错误,可以按“清除”再次输入键。


  ⑥确认每个参数正确后,按“启动”按键,启动电泳仪输出程序。显示在显示屏状态栏中Start!并发出4个声音,提醒操作员电泳计将输出高电压,注意安全。然后逐渐将输出电压添加到设定值。同时,在状态栏中显示“Run”并且有两个高压符号不断闪烁,表示端口有电压输出。实际工作时间(精确到秒)显示在状态栏底部。


  ⑦每次启动输出时,仪器会自动存储此时的设置值“MO”存储单元。以后需要调用的时候可以按“读取”键,再按“0”键,按“确定”按键即可取出上次设置的工作程序。


  ⑧仪器显示的电泳结束:“END”,并且连续蜂鸣提醒。此时按下任意一键即可止鸣。


  2.注意事项


  (1)U,I,P三个参数的有效输入范围是:U:5~3000V;I:4~400mA;P:4~400W.


  (2)一般情况下,当No Load!首先要关机检查电极线与电泳槽之间是否有接触不良,可以用万用表的欧姆档逐段测量。


  (3)如果输出端连接到多个电泳槽,则仪器显示的电流值为每个电池槽的电流之和,此时应选择稳压输出,以减少每个电池槽的相互影响。


  (4)注意保持仪器的清洁,不要遮挡仪器后方进风通道。严禁将电泳槽放在仪器顶部,避免缓冲液洒进仪器内部。


  (5)本仪器输出电压较高,使用中应不避免接触输出回路及电泳槽内部,以免发生危险。


  (6)长期不用仪器,应放置在干燥通风的清洁环境中保存。

 
 
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