培养液中细胞葡萄糖代谢实验观察倒置显微镜

培养液中细胞葡萄糖代谢实验观察倒置显微镜

  增加了培养液中碳酸氢钠弱解离作用从而产生过剩的H+降低培
养液pH。因此在密闭培养时需要大的上方空间，其体积要比培养液
大10倍，这个体积对供给足够的氧气也是需要的。这种一般的上方
空间对于大规模培养或连续流动空气的开放系统是不可能的，故后
者要求通过1个滤器供气并通过另1个滤器抽气。

  细胞进行葡萄糖代谢其结果是累积丙酮酸和乳酸盐。葡萄糖代
谢比细胞要求要快，因此培养液中理想的葡萄糖浓度是2g几以下，
在培养中补充葡萄糖比一开始增加葡萄糖的浓度更好一些，用半乳
糖或果糖代替葡萄糖是一种改良，因可明显减少乳酸的形成，但也
同时带来生长率缓慢的结果。这些防止非生理学的pH作用对小量培
养是成功的。当培养规模扩大时，培养上方空间及培养表面面积与
培养液容量的比例将减少。同时，为了增加细胞贴壁的表面面积及
增加单位体积的细胞密度开发了很多系统。

  pH控制系统的基本原理是一个经高压灭菌的pH检测探头，将信
号输入pH控制器，然后换成数字或类似的pH显示。这是一种pH监测
系统。要求按规定控制pH值的高低，pH不能超出这个范围。pH值调
整板上的这两个高或低规定点接转到1个能起动泵或螺线管活塞的
中继器上，这些装置将加入酸或碱使培养系统pH调整至规定的范围
内。一旦培养液与上方空间相平衡后，它是很少见到pH上升到规定
点之上，因而加入酸是忽略不计的，如果加入碱则推荐使用碳酸氢
钠(5．5％)、氢氧化钠(o．2mol几)只能用在快速搅拌率的培养系
统，因为局部浓碱在被稀释之前可损害细胞。

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