花粉细胞封藏与玻片制作检测生物图像显微镜

整体封藏与切片

新鲜的或固定的微小样品，可以不经切片直接镜检，例如花粉母细
胞、花粉、精细胞、用特殊方法人工分离出来的胚囊、卵细胞、合子等
，只有一层或少数几层细胞的厚度，光线可以穿透，将它们整体封藏(w
hole mount)后光镜检查很方便。甚至含有多层细胞的组织，有时也可
整体观察。例如，兰科植物的胚珠十分微小(顺便说一下，兰科属于微
子目)，常常仅有一层珠被细胞，缺乏珠心组织，可以直接在显微镜下
看到内部的胚囊和幼胚。大的胚珠，有数十层外围组织覆盖内部的胚囊
，需要经透明剂(例如水杨酸甲酯，俗称冬青油)处理后，才能透视内部
结构。整体材料的观察方法有其优点，除制作快捷外，更重要的一点是
能显示器官内各个细胞的三维空间关系，使人一目了然地获得自然的立
体图像。

但是，在大多数情况下整体封藏的材料毕竟难以洞察内部细胞的状
态，这就需要将材料切成薄片才能观察。谈到切片技术的发展，最先可
以追溯到徒手切片(free—hand section)。用支持物(如胡萝卜根)夹持
新鲜的或固定的材料，以锋利的刀片作重复的切削动作，可以从大量的
切片中挑选出比较平整而薄的切片进行观察。可以想象，初期的胚胎学
研究就是用这种简单、原始的技术取得了许多重大发现。甚至直到20世
纪50年代，个别研究者还在使用徒手切片，观察小麦子房的胚囊，看到
其中有生活原生质的运动。后来，在徒手切片的基础上，发明了各种切
片机(microtome)，可以控制切片的厚度，并且能获得更薄的、均匀一
致的切片。有一种切片机称为“滑走切片机”，多用于为较粗硬的材料
制作切片，成为木材解剖学中常用的技术。还有较迟发明的“振动切片
机”，可用来制作较厚的新鲜切片。但这些切片技术在植物胚胎学中应
用不广。应用最广而流传最久的切片技术是石蜡切片(paraffin sectio
n)。

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