细胞培养的无菌技术

细胞培养的无菌技术-细胞生物学研究显微镜

  细胞培养的无菌技术
  微生物无处不在，它们造成污染的可能性也处处存在。细胞培
养成功操作最基本的要点是：任何将与细胞接触的物品必须是无菌
的或没有污染的。要解决培养中的污染问题是一件烦琐的、令人沮
丧的、没有成功把握的工作，因此，最好的策略就是防止微生物污
染的发生。
  无菌技术
  无菌技术在理论上是很简单的：阻止无菌的、未被污染的物质
或物品与任何有菌的、被污染的物体相接触。成功的无菌技术的一
个基本因素就是个人卫生。任何直接或间接地与培养相接触的物品
必须无菌。理想化的情况是所有无菌操作都应该在一个层流式超净
台中进行。如果是在一个敞开的空间进行无菌操作，火焰灭菌则通
常是一种直接的、局部的灭菌方法。由于火焰形成的湍流会极大地
打乱无菌气流，因此火焰灭菌法应尽量少用。
  细胞运输的准备
  当单层贴壁细胞生长接近汇合状态、悬浮细胞生长到所需浓度
时，用25cm2培养瓶进行运输比较容易。首先倒掉瓶中培养液，装
满新鲜培养液；悬浮细胞培养瓶则直接加满新鲜培养液。装满培养
液可防止运输途中由于瓶子翻转而导致细胞变干。瓶盖要拧紧并用
胶带封闭。将培养瓶密封在一个防漏的塑料袋或其他防漏容器内，
这样可预防瓶子损坏后液体渗漏。再将这个一级容器放入二级隔离
容器内，可避免运输途中温度急剧变化。外包装盒上还应粘贴生物
危险品标签。一般地，培养物应在当天或过夜就到达目的地。

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