无菌操作实验稀释及滴定计数

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无菌操作实验稀释及滴定计数-细胞研究显微镜

无菌操作连续稀释及滴定计数
一、目的：利用稀释后的菌液滴定至培养基进行培养，之后计数其生菌数。
 三、原理：从高浓度稀释至低浓度，可藉由滴定后的菌落数，计算出菌的浓度及数量。
 四、材料： 
1.无菌培养皿  2.稀释液 3.振荡器  4.无菌操作台 5.NA agaer  6. 恒温培养箱
 7.E.coli 菌液  8.安全吸球 9.移液管  10.酒精灯 11.95%酒精  12.打火机  13.签字笔 
 14.试管 四、方法： 1. 10 倍连续稀释：
取0.5ml 样品+4.5ml 稀释液(0.85%NaCl+0.1%agar)→混合均匀(振荡)→共6管
2.滴定计数法(Drop method)：取50μl 适当稀释倍数之稀释液→滴入四区域之agar plate→
滴干后37℃培养→计数(隔天中午前观察) 3. 样品原液：E.coli，求得菌浓度