​大鼠ELISA试剂盒通用操作说明——中国生物器材网

每一次提醒你总能默默地记住，每一项任务你都会静静地完成，对自己及时反省让你慢慢地进步，望你带着这些好的品质去新的天地开拓，一定会有丰厚的收获。小编为大家介绍 大鼠ELISA试剂盒操作说明 。
操作步骤：   1.   标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100 l，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50 l，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100 l分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50 l，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50 l弃掉，再各取50 l分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50 l分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50 l，混匀后从第七、第八孔中分别取50 l加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50 l，混匀后从第九第十孔中各取50 l弃掉。（稀释后各孔加样量都为50 l，浓度分别为24ng/L，16ng/L ，8ng/L，4ng/L， 2ng/L）。   2.   加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40 l，然后再加待测样品10 l（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。   3.   温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   4.   配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。   5.   洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。   6.   加酶：每孔加入酶标试剂50 l，空白孔除外。   7.   温育：操作同3。   8.   洗涤：操作同5。   9.   显色：每孔先加入显色剂A50 l，再加入显色剂B50 l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.   10. 终止：每孔加终止液50 l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。   11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。