手把手教您给细胞台盼蓝染色——中国生物器材网

细胞骨架的荧光染色

台 盼 蓝 染 色

台盼蓝染色是细胞培养常见的实验，用于细胞计数，检测细胞活性。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝，而死亡的细胞，膜的完整性丧失，通透性增加，细胞可被台盼蓝染成蓝色。
 

小鼠胚胎干细胞台盼蓝染色

三步轻松搞定台盼蓝染色：
1、胰酶消化贴壁细胞，制备单细胞悬液，并作适当稀释（106 细胞/ml）。
2、染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
3、计数：在三分钟内，用计数板分别计数活细胞和死细胞 。 

台盼蓝染色看起来so easy，但新手入门还是需要注意：
1、染色时间不能太长，否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色，使检测结果偏离。
2、可结合细胞计数方法，同时进行细胞计数和活力检测。
3、有潜在致癌危险，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

BI台盼蓝染液

细胞免疫荧光染色

荧光显微镜技术，不仅用于研究蛋白结构，对细胞凋亡检测也具有重要意义。常用的包括：Hoechst、碘化丙啶（Propidium-Iodide，PI）、annexin-v、JC-1、钙黄绿素-AM等方法。

hoechst染色，紫外光下核染为蓝色

hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合，有hoechest33342和hoechst33258两种，区别不大。但是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些，所以一般hoechsts33258用于细胞固定后再染色，而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！
用PI单一染色观测培养细胞，只能表示细胞的坏死情况，而不是凋亡（当然晚期凋亡PI亦可着色）。但是如果您只是想知道细胞的死亡情况，而不是仔细区分坏死或凋亡，那么PI单一染色也可以。
JC-1染色非常简单。首先可将成品JC-1以DMSO配成储存液（1~5mg/ml），储存于-20℃，用时以培养液稀释至10ug/ml 终浓度。对贴壁细胞可以直接弃去培养液，漂洗细胞后直接加入染色液，10~30 min后在荧光显微镜下或者激光共聚焦下观察。用于悬浮细胞时还可以通过流式细胞仪进行检测，收集红/绿信号强度，计算其强度比。

总结

（素材来源于网络）
 

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