电转染小课堂教您如何做好细胞转染——中国生物器材网

重要通知：电转染小课堂开课啦

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重要的事情说三遍

 大家快赶紧关注

从本期开始将分享电转染方面的知识以及如何优化电转参数

Part 1 什么是电转？

电转即电穿孔，是一种有效的非病毒介导方法，可以将基因或其他分子高效地导入原核生物或哺乳动物细胞中。通过这种方法导入目的基因可以建立一个瞬时转染，以此来研究蛋白质表达，或可以导入siRNA来敲除或 沉默 基因，同时也可以通过电转方法来进行基因靶向和功能研究。

Part 2  电穿孔技术是如何将外源物质导入细胞中的？

电穿孔仪利用直流电脉冲瞬时电击细胞，增大细胞膜通透性或使细胞膜形成小孔，从而使小分子物质，如染料、寡核苷酸、肽等物质进入细胞。当直流电场去除掉，细胞膜可恢复原来的状态。

电转染的方法较化学法、脂质体法、和病毒法具有效率高、费时少、成本低、无细胞毒性等特点，因而被广泛采用。但是电击过大会造成细胞死亡，而电击不足会造成转染效率低，所以我们在进行电转染实验之前，需要对转染相关参数进行优化，以使转染效率最大化。

Part 3 如何评估转染效果？

我们一般用转染效率和存活率评估转染实验的效果。转染效率可以用 -半乳糖苷酶测定法/氯霉素乙酰转移酶测定法/绿色荧光蛋白法/流式细胞仪筛选法测定。细胞存活率可以用流式细胞仪筛选法/台酚蓝染色法测定。

转染效率=转染的细胞数/活的细胞数

细胞存活率=活的细胞数/总的细胞数

进行电转染实验时，增加场强，转染效率会增加，但是细胞存活率会降低，因此必须优化电参数，以寻求转染效率和存活率之间的平衡点。

下期预告：电转染小课堂之如何选择波形？

自从1938年BTX推出第一台商用电穿孔仪以来，BTX一直处于电穿孔技术的最前沿，一直致力于为各种细胞和组织类型提供完整的转染解决方案，包括真核生物，原核生物，体内组织，卵内，子宫内，贴壁和悬浮培养，植物细胞，皮肤和肌肉免疫。除电穿孔仪外，BTX还为各种应用提供和研发专业的电极。北京德泉兴业商贸有限公司为BTX在北京和东三省地区的一级代理。欢迎致电联系我们。