细胞冻存液的配制方法和注意事项_91化工仪器网

  细胞冻存是现在生物科学中，非常重要的保存细胞的一种非常有效的手段，细胞冻存最主要的就是细胞冻存液的使用，在细胞冻存过程中，配合细胞冻存液的使用才可以让细胞较大程度的保持其原有的一种活性。那么细胞冻存液的配制方法和注意事项有什么呢？  目前细胞冻存的过程中，大多都是采用甘油或者二甲基亚砜作为细胞冻存的保护剂，常用细胞冻存液的组成成分包括：20％的血清、10％的DMSO、70％的1640培养液；或者可以采用90％的血清、10％的DMSO，这样的配制方法可以更加防止细胞内的冰晶形成。配制过程中需要将DMSO和FBS加入到DMEM之中，然后各自的含量占总体积的10%，最后需要滤膜过滤后进行分装，用以保存备用。DMSO在冻存液中分子量小、溶解度较大、易透过细胞膜，这样就会降低细胞外溶液中的溶质浓度，可以使细胞免受高浓度溶质的伤害，细胞内的水分也不会外渗的过多，所以这样就更加的避免了由于细胞过分脱水而产生皱缩的现象产生。DMSO与水分子产生结合，这样就可以使冰点下降从而可以减少细胞内冰晶的形成，减少冰晶损伤。  在配制细胞冻存液的时候，需要注意：DMSO这一物质不能够用高压进行灭菌处理；DMEM不能使用高温高压进行灭菌处理，不过可以进行过滤除菌。DMSO在配制的时候必须要用新的，而且需要注意要进行避光保存。DMSO中必须含10%FBS的DMEM。细胞冻存液的配制必须要保证是在无菌的条件下进行的，很多时候由于实验人员没有做好消毒工作而导致冻存液的配制失去原有功能是常有的事情，所以每一个实验人员都需要严格的注意操作环境。

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