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支付方式：支付宝 | 网上银行更新时间：2018.10.121067
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荧光探针法PCR试剂盒采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR ）技术检测禽组织、分泌物和排泄物中所有亚型的AIV，适用于AIV的检测、诊断和流行病学调查。
产品介绍
荧光探针法PCR试剂盒说明书
【试剂盒简介】
禽流感病毒RT-PCR 检测试剂盒，采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR ）技术检测禽组织、分泌物和排泄物中所有亚型的AIV，适用于AIV的检测、诊断和流行病学调查。
【原理】
利用吸附柱提取RNA作为模板，在反转录酶的作用下，以引物为起点合成与RNA 模板互补的cDNA链；然后在DNA 聚合酶的作用下，经高温变性、低温退火和中温延伸的多次循环，使特异DNA 片段的拷贝数放大数百万倍。将扩增的DNA 片段进行电泳、染色后，在紫外灯下，肉眼可见DNA 片段的扩增带。
大肠菌O157检测试剂盒（玻片乳胶凝集反应法）大肠埃希氏菌血清志贺氏菌诊断血清无菌脱纤维马血无菌脱纤维兔血【试剂盒组份】
1. 生理盐水
20mL
8. 吸附柱和收集管
10套
2. 裂解液
6mL
9. 0.2 mL 薄壁PCR 管
15个
3. 洗涤液A
7mL
10. RT-PCR 反应液A
180 L
4. 洗涤液B
7mL
11. RT-PCR 反应液B
50 L
5. 洗脱液
500 L
12. 50 倍TAE 电泳缓冲液
20mL
6. 阴性对照
300 L
13. 染色液
10 L
7. 阳性对照
300 L
注：塑料袋内试剂（阳性对照、RT-PCR反应液A和B）-20 ℃冻存，裂解液2-8℃冷藏，其他室温保存。
【荧光探针法PCR试剂盒操作方法】
一、样品制备
1样品采集：：病死或扑杀的禽，取肺、脾、脑等组织；待检活禽，用棉拭子取呼吸道分泌物，放于50%甘油生理盐水中或用注射器取血5 mL，2～8 ℃保存。（要求送检病料新鲜，严禁反复冻融。）
2.1 组织样品的处理：称取组织0.1g于研磨器中磨碎，再加1mL生理盐水继续磨至无块状物；然后将样品转至1.5 mL灭菌离心管中，8000 rpm离心2 min，取100 L上清于1.5 mL 灭菌离心管中。2样品处理：
2.2 全血样品的处理：待血凝后取100 L血清于1.5 mL 灭菌离心管中。
2.3 阳性对照的处理：取阳性对照 100 L于1.5 mL 灭菌离心管中。
2.4 阴性对照的处理：取阴性对照100 L于1.5 mL 灭菌离心管中。
二、病毒RNA的提取
1. 取已处理的样品、阴性对照和阳性对照，分别加入450 L裂解液，充分颠倒混匀，室温静置3min 。
2. 加入275 L无水乙醇，轻轻混匀。
3. 将混合液吸入吸附柱中（吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质，以免离心时堵塞吸附柱），10,000 rpm 离心1min，弃去收集管中液体，套回收集管。
4. 向吸附柱中加入500 L洗涤液A，10,000 rpm 离心1min，弃去收集管中液体，套回收集管。
5. 向吸附柱中加入500 L洗涤液B，10,000 rpm 离心1min，弃去收集管中液体，套回收集管。
6. 空柱10,000 rpm 离心2 min。
7. 将吸附柱移入新的无RNA酶的1.5 mL离心管中，在膜中央加入30 L洗脱液，室温静置2min，10,000 rpm 离心1min，获得总RNA。
三、RT-PCR
1. 反应体系：分别取14 L RT-PCR反应液A（用前混匀）、4 L RT-PCR反应液B（用前混匀）和2 L模板RNA，混匀。
2. 反应程序：在PCR仪上运行以下程序：42 ℃ 45 min，94 ℃ 3 min ；94 ℃ 30 s 、53℃ 30 s 、72 ℃ 30 s，35个循环；72 ℃延伸10 min。
四、电泳
1. 制胶：用50倍稀释的TAE电泳缓冲液配制1%琼脂糖凝胶。
2. 电泳：待胶凝固后，取5 L PCR扩增产物点样于琼脂糖凝胶孔中，以5V/cm的电压于50 倍稀释的TAE 电泳缓冲液中电泳。
3. 染色：取50 倍稀释的TAE 电泳缓冲液30mL，加入10 L染色液，混匀后将胶浸泡30min，于紫外灯下观察结果。
【结果判断】
阳性对照出现400bp扩增带，阴性对照无带出现（引物带除外）时，实验结果成立。被检样品出现400bp扩增带为新城疫病毒阳性，否则为阴性。
【需用但未提供的材料】
组织研磨器、眼科剪、眼科镊、一次性注射器、琼脂糖、经焦碳酸二乙酯（DEPC ）处理的灭菌1.5mL 离心管和吸头（10 L、200 L、1000 L）。
【注意事项】
1．本试剂盒有效期为6个月，不要使用超过有效期限的试剂，试剂盒之间的组分不要混用。
2．所有试剂应在规定的温度储存，使用时拿到室温下，使用后立即放回。
3．注意防止试剂盒组分受污染。使用前将塑料袋内试剂瞬离15s，使液体全部沉于管底，放于冰盒中，吸取液体时移液器吸头尽量在液体表面层吸取。
4．严格按试剂盒说明书操作可以获得Z好的结果。操作过程中移液、定时等全部过程必须精确。
5．RNA提取过程中，应戴口罩、勤换手套，尽量缩短操作时间。
6．所有接触病料的物品均应合理处理，以免污染实验室。
公司优势：
1）质量：我司提供的的试剂均经过出厂检测。不对可退换
2）价格：价格实惠，量大从优，产品价格随时会变动，实时报价还请来电获取。
4）服务：提供完整的售前、售后和售中服务。售后到底
除了禽流感病毒RT-PCR核酸检测试剂盒??我公司还提供：
A群溶血链球菌T型检测用诊断血清B群链球菌检测试剂盒（玻片乳胶凝集反应）A群链球菌检测试剂盒（玻片乳胶凝集反应）肠炎弧菌检测用诊断血清沙门氏菌诊断血清以上信息由企业自行提供，信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责，91化工仪器网对此不承担任何保证责任。
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