Hank s液是生物医学试验中常见的平衡盐溶液(BSS)之一,简称HBSS。主要用于配制培养液,稀释剂和细胞清洗液,而不能单独作为细胞,组织培养液。D-Hank s与Hank s的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子,因此D-Hank s常用于配制胰酶溶液。
Hanks液的配制
原液A
NaCl
160g
MgSO4 7H2O
2g
KCl
8g
Mg Cl2 6H2O
2g
CaCl2
2.8g
溶于1000ml双蒸水
原液 B
(1)
Na2HPO4 12H2O
3.04g
KH2PO4
1.2g
葡萄糖
20.0g
溶于800ml双蒸水
(2)
0.4%酚红溶液:取酚红0.4g,置玻璃研钵中,逐滴加入0.1N NaOH,并研磨,直至完全溶解,约加0.1N NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中,用双蒸水洗下研钵中残留酚红液,并入量瓶中,后补加双蒸水至100ml。
将(1)液和(2)液混合,补加双蒸水至1000ml,即为原液B。
应用液
原液A
1份
原液B
1份
双蒸水
18份
混合后,分装于200ml小瓶中,10磅高压蒸气灭菌15分钟,临用前用无菌的5.6% NaHCO3调pH至7.2~7.6
注意事项:
1.BSS的pH值应确定为7.2-7.4之间。
2.如配制的Hanks液高压灭菌后液体变混浊,则可将100 mL的CaCl2与含有其他成分的液体分别装瓶高压灭菌之后,再在无菌条件下配制,定容。这样可以避免高压灭菌后液体变混。
3.胰酶受热易失活,所以尽量避免盛夏配制,并且在配制过程中温度应始终保持在4℃左右。
4.胰酶研磨要充分,否则在过滤时会将较大的颗粒过滤掉,不能达到真正的浓度。
5.胰酶分装时尽量分装成多瓶,并遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则。因为冷冻保存时体积会膨胀,而多次使用同一瓶胰酶反复冻融会降低消化效果并可能造成污染。
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