尼氏染色法操作步骤及注意事项_91化工仪器网

尼氏染色法主要特点：操作简便染色稳定、分化时间短，适用范围广，可以用于石蜡组织切片的尼氏物质/尼氏小体、神经元等。 尼氏染色法操作步骤：1.固定：可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福尔马林溶液。2.组织切片：石蜡切片7~10 m或25 m(见注意事项4)。3.切片脱蜡入水。4.用甲基紫染色液涂片，染色10~20min。5.蒸馏水冲洗。6.用NisslDifferentiation分化4~8s，直到大部分染色被消除。7.直接经无水乙醇至二甲苯，显微镜下观察。8.如果有必要，重复步骤6和7。重复时，给予少量NissolDifferentiation分化。9.在二甲苯中充分冲洗。加拿大香脂或DPX封片。 尼氏染色法注意事项：1.尼氏体离体后容易溶解，所以组织取出后应立即固定，否则难以着色。2.组织固定起着非常重要的作用，固定可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福尔马林溶液。3.本染色液对石蜡组织切片的尼氏染色效果较好。4.如果要证实尼氏物质的存在，那么染色后必须要用NissolDifferentiation分化。5.石蜡切片厚度7～10 m或25 m(皮质神经元密度的评估要用25 m厚的切片)。6.染色后的标本务必避光保存，否则容易褪色。7.主要由甲基紫染色液、分化液等组成。尼氏物质呈紫黑蓝色,神经元呈淡紫蓝色,细胞核呈紫蓝色。

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